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实验十二 草履虫的形态结构与活动
原生动物是最简单最原始的动物，一个原生动物只有一个细胞组成。其中部分细胞质分化成具有多种形态和功能的细胞器，分别执行着类似高等动物一些细胞器的功能，共同行使多细胞动物的全部的生命活动，从而成为一个完整、独立的动物有机体。草履虫的形态结构和生命活动体现了原生动物的典型特点，是原生动物的基础理论研究的理想材料。 一、目的与要求
（一） 通过对草履虫的显微观察，了解纤毛纲动物的主要形态特征及运动行为。 （二） 总结单细胞动物有哪些细胞器的分化及其功能，进一步认识单细胞原生动物是一个完整的能独立生活的动物有机体。 二、材料与用品：
草履虫培养液；显微镜，盖片，载片，试管，移液管，毛细滴管，量筒，秒表，滤纸，醋酸，氧化钠，中性红，精密pH试纸（pH范围0.5-5.0和5.0-7.0），吸水纸，脱脂棉，冰醋酸，5％醋酸，1％NaCl溶液，蒸馏水等。 三、实验操作与观察
（一） 草履虫的形态结构及运动观察
1. 用吸管吸取草履虫培养液滴在一干净载玻片中间。注意（用低倍镜检查其密度及游速）为便于观察，可将少许棉花纤维扯松放在液滴上。亦可加一滴蛋清液，盖上盖玻片，用低倍镜观察，如果草履虫游动仍很快，则用吸水纸在盖玻片一侧吸去部分水分，直至适合于观察为止。注意：在观察过程中，不可使装片完全失水。 2. 草履虫的外形及运动方式：
草履虫形似倒置的草鞋底，前端纯圆，后端稍尖，体表密布纤毛，体末端有一束较长纤毛。从虫体的前端开始，体表有一凹沟斜向后行直到虫体中部称为口沟，口沟处有较长的纤毛。游动时，草履虫全身纤毛有节奏地呈波浪状快速摆动，由于口沟的存在和该处纤毛摆动有力，使虫体绕其向左旋转，沿螺旋状路径前进。（思考：当遇到阻挡物时虫体如何游动？） 3. 草履虫的内部构造：
选择一个比较清晰而又不大活动的草履虫转高倍镜观察： （1） 表质膜：为虫体最外层具有弹性的薄膜，布满纤毛。 （2） 外膜：紧贴表质膜的一层细胞质，透明无颗粒。
（3） 刺丝泡：紧贴外质与表膜垂直排列的折光性很强的半透明杆状体。在盖玻片一侧加一滴1％醋酸或碘液，可见刺丝泡放出刺丝（思考：刺丝泡有何功能？） （4） 内质：外质以内的细胞质，多致密颗粒。 （5） 胞口：口沟末端的椭圆形小孔。
（6） 胞咽：与胞口后端相连并深入内层的弯曲短管。其壁上生有由长纤毛联合形成的波动
膜。（思考：观察口沟纤毛和胞咽波动膜的波动，起波动有何功能？）
（7） 食物泡：充满体内大小不一的圆形泡。可在盖玻片边缘滴加0.01％中性红染液。10分钟后可观察上色的食物通过口沟胞咽在草履虫体内形成食物泡和食物泡在体内的移动路线。
（8） 伸缩泡：在虫体前后各有一透明的圆形泡，可伸缩。当伸缩泡主体缩小时，可见其周围有6-7个成放射状排列的长形透明管。（思考：注意前后两个伸缩泡之间及伸缩泡的主泡与收缩泡之间在收缩上有何规律？）
（9） 细胞核：在内质中央有大小两个细胞核，生活时小核不易观察到。在盖片一侧滴一滴5％冰醋酸，另一侧用吸水纸吸引，1-2分钟后，草履虫被杀死。在低倍镜下可见位于虫体中部被染成黄褐色的肾形大核，转高倍镜聚焦后可见在大核凹处有一点状小核。 （二） 草履虫的应激性实验
1. 草履虫对盐度变化的反应：
（1） 用不同浓度的NaCl溶液刺激：取5块干净载片，第一片滴入蒸馏水作对照，其余4块分别滴入0.1％、0.3％、0.5％、0.8％的NaCl溶液，再用毛细滴管吸取密集草履虫培养液分别滴一小滴于各载玻片的溶液中（注意：草履虫液不宜过多，以免稀释了盐溶液；各浓度的NaCl溶液中滴入草履虫溶液后均于5分钟后观察，因此要安排好时间），混匀，加棉纤维和盖玻片，制成临时装片，依次置于显微镜下观察。
（2） 伸缩泡的收缩频率的变动：在低倍镜下选1个清晰又不太活动的草履虫，转高倍镜观察其伸缩泡的收缩频率的变化。用秒表记录伸缩泡的收缩周期，重复三次，取平均值。并推算每分钟的收缩频率，再取2只草履虫，重复以上计数，最后得出3只草履虫伸缩泡的平均收缩频率。（思考：伸缩泡有何功能？为何要重复计数和计算平均收缩频率？）
按以上方法观察记录，计算并比较草履虫在蒸馏水和不同浓度NaCl溶液中伸缩泡的收缩频率。注意观察草履虫在0.8％NaCl溶液中，其形体和运动有何变化。在盖片一侧加蒸馏水，另一侧用吸水纸吸水，使蒸馏水替代0.8％NaCl溶液，观察草履虫有何变化，以上现象说明什么？
2. 草履虫对酸刺激的反应
（1） 配制醋酸溶液：用滤纸过滤草履虫培养液，取冰醋酸和滤液配成浓度为0.01％－0.02％和0.04％－0.05％醋酸溶液。（思考：为什么不用蒸馏水配制醋酸溶液？） （2） 草履虫对酸刺激的反应
用滴管吸取密集草履虫培养液滴于载玻片上，使液滴为直径略小于载玻片宽度的一片圆形液层。将载玻片置于显微镜载物台中央，用低倍镜观察其密度及分布，用毛细滴管吸取0.01％－0.02％醋酸溶液，轻轻滴一滴在载玻片上草履虫液层中央，（注意：滴加醋酸溶液时，最好通过滴管尖端与玻片上草履虫液面接触而使酸液缓缓进入草履虫液层中央），在镜下观察草履虫动态。用pH试纸分别轻轻浸入液层中草履虫聚集处和滴入酸液处，检测其pH值。再
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2022-12-15
