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分子生物学实验 教学大纲
课程编号:14120107010 适用专业:生物科学 学时数:36 学分数:1
一、实验目的与要求:
分子生物学实验是生物技术专业的一门专业基础课程,是一门独立的实验课程,同时也是为了配合分子生物学的教学而开设的。实验过程中,首先将有关的基本原理、基本技术和方法给学生做一介绍,然后将分子生物学实验中要用到的仪器以课件的形式展示给学生,在学生掌握了以上基本知识的基础上给定实验内容和目的,让学生自行设计实验方案并完成,得出一定的实验结论。希望通过本实验培养学生主动学习、学以致用、独立思考的能力。
二、实验项目与提要: 序号
实验项目
必做 选做
时数
内 容 提 要
实验 类型
每套仪 器人数
利用碱变性方法从E.coli中
细菌质粒的大量提取
大量提取基因工程中运载
必做
3
基因的载体质粒,掌握最常基础 见的碱变性大量制备质粒DNA技术方法。
去除质粒DNA中的杂质,纯
质粒DNA的纯化
化质粒DNA以利于以后的
必做
3
酶切分析和克隆。通过实基础 验,掌握最常用的苯酚氯仿法去除蛋白质和RNA酶分第 1 页/ 共 3 页
2 2
1
2
解RNA的方法。
3
动物基因组DNA的提取
必做
6
了解从动物组织中提取DNA的基本原理及其方法 学习水平式琼脂糖凝胶电
琼脂糖凝胶电泳
泳,检测质粒DNA和染色体
必做
3
DNA的纯度,检测质粒DNA基础 的构型,含量以及分子量的大小。
DNA的限制5
性内切酶酶切及电泳检测
DNA酶切片6
段的分离与必做 回收
3
必做
3
学习用限制性内切酶酶切DNA片段的原理与方法,在体外对质粒DNA或染色体基础 DNA进行酶切,并进行电泳检测
学习从琼脂糖凝胶中分离回收DNA片段的几种方法基础 的原理与操作技术 学习PCR反应的基本原理与
PCR扩增技术
实验技术,了解引物设计的
必做
6
一般要求。
进行PCR反应,体外扩增得到特异性DNA片段
SDS-PAGE聚丙烯酰胺8
凝胶电泳检必做 测重组蛋白的表达
6
了解SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,掌握进行SDS-PAGE聚丙烯酰胺基础 凝胶电泳检测重组蛋白表达的技术与方法
了解总RNA和mRNA提取的
9
RNA的提取
选做
6
基本原理,从真核细胞中提综合 取总RNA并进行琼脂糖凝第 2 页/ 共 3 页
2 2
基础
2 2 2 2
基础
2
4
7
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