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酪素水解试验（酪蛋白水解）
微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 酪素水解试验（酪蛋白水解）
牛奶平板的制备：取5g脱脂奶粉加入50mL蒸馏水中（或用50mL脱脂牛奶），另称1.5g琼脂溶于50mL蒸馏水中，将两液分开灭菌。待冷至45－50℃时，将两液混匀倒平板，即成牛奶平板。将平板倒置过夜，使表面水分干燥，然后将菌种点接在平板上，每皿可点接3－5株菌。适温培养1、3、5天，记录菌落周围和下面酪素是否已被分解而呈透明。
配制该培养基时，切勿将牛奶和琼脂混合灭菌，以防牛奶凝固。
七叶灵水解试验
试验在七叶灵缓冲液中进行。该缓冲液的组成是,七叶灵5.0克、枸椽酸铁铵0.5克,氯化钠8.0克、磷酸氢二钾0.4克、磷酸二氢钾0.1克及蒸馏水1000 ml。校正pH至5.6±2,分装备用。试验时,取4～6个菌落接种在0.5ml七叶灵缓冲液中,使其浊度与Mc-Farland第三管相近,放37℃水浴。每隔30分钟、60分钟和2小时观察结果。溶液变黑为阳性反应。
分解纤维素试验
就用以纤维素为唯一C源（1%）的无机盐培养基就可以了，1L培养基加0.2-0.4g的刚果红，产透明圈的菌就是纤维素分解菌。接种后30度培养。
纤维素刚果红培养基(初筛) : KH2 PO4 0. 5 g、MgSO4 0. 25 g、纤维素粉1. 88 g、刚果红0. 2 g、琼脂14. 00 g、明胶2. 00 g、水1 000 mL, pH值7. 0。
酪氨酸水解
酪氨酸水解
微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。
将L－酪氨酸0.5g悬浮于10mL蒸馏水中，8磅20分钟灭菌，然后于100mL无菌的营养肉汤琼脂混合，倾倒平板，待凝固后，将测试菌接种于平皿上，培养7到14d，记录酪氨酸结晶是否被水解而变透明。
厌氧硝酸盐产气
厌氧硝酸盐产气
在厌氧情况下，有些好氧细菌，能以硝酸盐代替分子氧作为受氢体，进行厌氧呼吸，将硝酸盐还原为气态氮，即为土壤中的反硝化作用。某些芽孢杆菌，假单胞菌及产碱菌等属的细菌具有此反应。
培养基：普通肉汁腖培养液100ml、KNO3 1g 调ph7.2—7.4，分装试管，每管培养基高度约5厘米，灭菌，使用前在沸水煮10分钟，以赶出溶解于培养基中的空气，并在冷水冷却后接种。
接种封油：以斜面菌种用接种环接种后，用凡士林油（凡士林和液体石蜡为1：1）封管，封油的高度约1厘米。必须同时接种不含有硝酸钾的肉汁胨培养液作对照。
观察结果：培养2－7d，观察在含有硝酸钾的培养基中有否生长和产生气泡。如有气泡产生，表示反硝化作用产生氮气，为阳性反应。但如不含硝酸钾的对照培养基也可产生气泡，则只能按可疑或阴性处理。
明胶（Gelatin）液化试验
明胶（Gelatin）液化试验
有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。
培养基：蛋白胨5g、明胶100-150g、水1000ml。ph7.2-7.4，分装试管，高度约4-5厘米，灭菌。 试验方法：挑取18~24h待试菌培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20~22℃培养7~14天。要有未接种的空白对照。明胶高层亦可培养于36±1℃。每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化，如确被液化，即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂，若为阳性，10~20min后，菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。
淀粉水解试验
淀粉水解试验
某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20°培养5天。然后将碘试剂直接滴浸于培养表面，若为液体培养物，则加数滴碘试剂于试管中。立即检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。
淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性，以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。
靛基质试验
靛基质（Imdole）试验
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2024-01-23
