【#文档大全网# 导语】以下是®文档大全网的小编为您整理的《EDC使用建议》,欢迎阅读!
1、EDAC和EDC好像是同一个东西,不是差不多。
2、pH=5最好用缓冲溶液来调,MES。
如果不能用缓冲溶液,就先调好,再加,不然调来调去的就分解了。毕竟EDC用量少,对pH影响小。
3、EDC是活化COOH的,所以理论上讲应该是先和COOH组分混合,反应10-15min后再加入NH2组分。如果你的体系简单,可以一起加(A分子含COOH,B分子含NH2),如果是蛋白或者氨基酸的反应,有副反应的,最好先和COOH组分反应。
4、EDC反应的中间产物不稳定,最好用sulfo-NHS活化,经典组合。NHS据说水溶性不好。
5、如果没有sulfo-NHS,文献上也有用NHS在水里面做的,我没做过,不知是否可靠。不过有替代方法,就是COOH在有机溶剂中DCC催化和NHS先反应,纯化后水溶液直接和NH2反应。不需要EDC了。
6、EDC可以配成溶液,也可以粉末直接加,就怕你秤不准。
为了提高 酰胺键的 转化率 EDC 一定要过量,过量到什么程度,好像没有你说的1000:1那么高的,我看过几篇文献里用到EDC的 36:1是最大的,用量少的 1.2:1,但是用量少的一般都是和NHS一起用的,而且是在 ph 5 左右的缓冲溶液里。
如果你的反应物都溶于水,建议用 EDC,NHS in MES buffer ph-5.2~5.5,如果你的反应物有不溶于水的,只能用有机溶剂作为反应介质,建议你只用EDC 试一试,最好不要用DCC,因为副产物真地很难除净,如果实在没办法了,再用DCC,NHS 试试吧。
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