薄层色谱操作方法

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薄层色谱操作方法

1．薄层板制备 可以购买商品的预制板(有一般薄层板及高效薄层板)，

在紫外光254nm或365nm照耀定位用。在紫外光照耀下，薄层板显荧光，样品斑点处不显荧光。 2．点样 样品制成溶液(溶剂最好挑选与绽开剂极性相像且易于挥发的有机溶剂)，浓度约0.5～2mg/mL。点样

也可以自行制备。制备办法是：将玻璃板裁成正方形或长方形，分析用

量为0.5～5 uL，在距底边1cm处点样，原点直径在3～4mm。手工点

为20cm×20cm和10cm×20cm；预试用为3cm×10cm和2.6cm×7.6cm(显

样用毛细管或微量注射器，如用点样仪点样，样量精确，外形整齐全

微镜用载玻片)。将玻璃片洗净烘干。铺层办法有干法和湿法两种，现

都，能提高定量分析的精确 度。 点样量与薄层性能、厚度

常用湿法，由于它具有薄层牢固、可批量制备、绽开后便于保存、分别

及显色敏捷度有关，按照需要来详细确定。点样量太小，斑点不能显

效果好等优点。 选用粒径为0.048～0.058mm (250～300目)的硅胶，

示，点样量太大，影响比移值和斑点外形。 3．绽开 首先是挑选绽开

加入(CMC)或锻石膏(CaSO4·1/2H2O)为黏合剂(市售硅胶G是已加了

剂，合适的分别体系是分别胜利的关键，挑选原则与经典柱色谱相同。

12％～14％煅石膏的硅胶)，加入约3倍体积的水，调成糊状，倾倒在

合适的绽开剂使组分绽开后斑点清楚、集中、不拖尾，待测组分的Rf

玻璃板上，轻轻颠动玻璃板，调好的硅胶自动淌成匀称薄层。也可用涂

值最好为0.4～0.5。如待测组分较多，Rf值也可在0.25～0.75。可

铺器铺层。按照用途薄层厚度可不同，普通分析用约为0.25mm，制备

借鉴手册和文献及绽开剂挑选最佳化办法通过试验挑选。 绽开的试验

用约为1～3mm。涂铺好的薄层板在室温晾干后，按照活性要求在一定

操作是将点样后的薄层板置于密闭的层析槽中，下端浸入绽开剂高度

温度下加热活化后存于干燥器中备用。 市售的薄层用硅胶标有硅胶

不应超过0.5cm。绽开距离普通为10～15cm。按照溶剂移动的方向分

GF254和硅胶GF365，即为加有1.5%～2％荧光剂的荧光薄层板，用于



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