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实验四 常见食物营养成分的鉴定
一、实验目的
1、掌握临时装片(水装片)制片方法。 2、掌握徒手切片技术。
3、掌握常见植物性食物组织中糖类、脂肪的定性鉴定方法。
二、实验原理
植物因含有叶绿素,是自然界的初级生产者,能通过光合作用过程把太阳能转化为化学能,贮存在糖类、蛋白质和脂肪中。这些物质是人类赖以生存的食物来源。人类食物有3000多种,其中主要的粮食植物就有20多种。这些植物可食部分有的是果实,如苹果、梨、水稻、玉米;有的是种子,如花生、油菜、黄豆、大豆;有的是块茎,如马铃薯;有的是块根,如山芋(番薯)。其营养成分有的是糖类,如苹果和梨主要是可溶性的葡萄糖和果糖;水稻、玉米、马铃薯、山芋是不溶性的多糖──淀粉;有的是蛋白质,如黄豆、大豆;有的是脂肪,如花生、油菜。
特定的化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。葡萄糖、果糖是可溶性糖中的还原糖,与斐林(Fehling)试剂作用,可以生成砖红色沉淀;淀粉是不溶性的多糖,被碘-碘化钾溶液染成蓝紫色。脂肪可以被苏丹Ⅳ染液染成桔红色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应。为此来鉴定生物组织中糖、脂肪或蛋白质的存在。
三、实验用品 (一)材料
1.做可溶性还原糖的鉴定实验,选择苹果、梨。 2.做淀粉的鉴定实验,选择小麦颖果和马铃薯。 3.做脂肪的鉴定实验,选择花生种子。 (二)器材
剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。
(三)试剂
1.斐林试剂 取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂甲。
取5 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.05 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂乙。
使用时将4~5滴乙液滴入2 mL甲液中,配完后立即使用。
2.碘-碘化钾(I-KI)染液 取3 g碘化钾溶于100 ml蒸馏水中,再加l g碘,溶解后即可使用。它可将蛋白质(糊粉粒)染成黄色。将4%的碘-碘化钾溶液加水稀释4倍,可用于鉴定淀粉,染成蓝紫色;若将l%的碘-碘化钾溶液加水稀释
100倍,即制成0.0l%的碘-碘化钾溶液,可用于观察淀粉粒的轮纹,比较清晰。
2.苏丹Ⅳ染液 取0.1 g苏丹Ⅳ溶解于50 ml丙酮中,再加入70%乙醇50 ml。
四、实验操作
(一)可溶性还原糖的鉴定
1.制备生物组织样液 将梨洗净、去皮,切成小块。用简易磨浆机将梨进行研磨。在大漏斗上垫一层纱布,将梨研磨液进行过滤,滤液置大烧杯中。供全体学生使用。
2.取1支试管,向试管内注入2 mL梨组织样液。
3.向试管内注入2 mL刚配制的斐林试剂。振荡试管,使溶液混合均匀,此时溶液呈蓝色。
4.将这支试管放进盛有开水的大烧杯中,用酒精灯加热煮沸2 min左右。在对试管加热煮沸的过程中,仔细观察试管中溶液的颜色的变化。
(二)淀粉的鉴定
1.小麦果实结构及胚乳中的淀粉。取一粒已浸泡的小麦种子,观察外形,腹面有一纵沟,在较小的一端有一丛果毛,另一端有一长卵形小体为胚。通过腹沟将整个“种子”纵剖为二,用放大镜观察,可明显分为两部分,中央乳白色部分为胚乳,外部颜色较深的部分为果皮和种皮的总和,胚偏居一角(图4-1)。如在纵剖面上滴少量l%的碘-碘化钾,变成兰色的部分是胚乳,浅黄色部分是胚的部分。取小麦胚纵切片在显微镜下观察胚的结构。它也由胚根、胚轴、胚芽和子叶四部分组成,但子叶只有一个,在靠近胚乳一面,因成盾形,也叫盾片。胚芽和胚根外都包着一套状的组织,即胚芽鞘和胚根鞘。
2
.马铃薯淀粉粒 用针从块茎上取
下
少图4-2 马铃薯淀粉粒的类型
许4-1 禾本科颖果的结构 A.单粒淀粉粒; B.半复粒淀粉粒;
薯A、B. 玉米颖果;C、D.小麦颖果 C、D复粒淀粉粒
肉,
在载玻片上涂抹,用水封片,在显微镜下看到发亮的卵圆形或椭圆形颗粒即淀粉粒(图4-2),留意淀粉粒上的轮纹。滴0.0l%的碘-碘化钾溶液,观察颜色变化。
(三)脂肪的鉴定
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