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植物细胞质壁分离与复原详细实验步骤
(一)制作临时装片并观察 1、制片
① 、用拇指和食指夹住载玻片,然后取三层纱布沿一个方向 擦拭载破片,直到对 光看到载玻片光亮无污物为止。
② 、在载玻片上滴一滴水。(注意胶头滴管的正确使用方法:①握持方法是用中 指和无名指夹住玻璃管部分以保持稳定, 用拇指和食指挤压胶头以控制试剂的吸 入或滴加量。②不能倒置,也不能平放于桌面上。③胶头滴管加液时,不能伸入 容器)
③ 、 A 、洋葱:选用紫色特别深的洋葱外表皮,用刀片划 “井”字,用镊子轻轻 撕 取中间的小正方形。(注意在洋葱未经过处理时一定要取外表皮) 由于每种材料主要只在取材上有区别, 其它步骤基本类似。 下面老师演示一种洋 葱鳞片叶外表皮装片。 ④ 、将撕取的洋葱鳞片叶外表皮借助解剖针放在水滴中 展平,主要是为了细胞尽 量无重叠。
⑤ 、用镊子夹住盖玻片盖在载玻片上(同学们注意:盖盖玻片应让盖玻片的一侧 以大约45 •先触及载玻片,然后轻轻放平,防止装片产生气泡)如果四周水过 多可以用滤纸吸一下。
2、观察洋葱细胞
显微镜使用顺序: 取镜—安放—对光 (无载破片) 打开光源—低倍镜对准通光孔 —聚光器调到最高—调节反光镜—把宏光光圈打开 (如果还不够亮可以稍微动一 下粗准焦螺旋) —放装片—先用低倍镜调粗准焦螺旋至物像清晰,并调至中央, 后扭转物镜转换器用高倍镜 观察
可以看到洋葱鳞片叶表皮细胞中紫色的中央液泡, 还可以看到原生质层紧贴着细 胞壁。 (二)、观察质壁分离及复原 1、观察质壁分离现象
① 取下载玻片(如果不取下,在载物台上滴加蔗糖会一不小心滴漏在显微镜上, 会损坏显微镜)
② 从显微镜上取下装片,放在实验桌上。从盖玻片的一侧滴入 0.3g /mL的蔗糖 溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引, 重复几次, 为什么要重复呢?让盖玻片 下面的洋葱鳞片叶完全侵润在蔗糖溶液中。
③ 高倍镜观察表皮细胞发生的变化。 中央液泡变小,原生质层脱离细胞壁 2、观察细胞质壁分离的复原现象
① 取下载玻片(如果不取下,在载物台上滴加清水会一不小心滴漏在显微镜上, 会损坏显微镜)
② 从显微镜上取下装片,放在实验桌上。从盖玻片的一侧滴入清水,在盖玻片另 一侧用吸水纸吸引,这样重复几次。洋葱鳞片叶表皮浸润在清水中。
③ 用高倍显微镜观察,可以看到中央液泡逐渐胀大,原生质层又逐渐贴向细胞壁。 实验
结束后记得用纱布把显微镜擦干净放回原处,其他用具也清洗干净放回原
处,下面3人一组,每组必须两种材料各做一个装片, 三位老师各负责一个大组 的指导工作。
3、画出所观察到的图形并用表格记录现象
观察到的现象
观察结果记录 处理方法 实验前不做任何处 理 用蔗糖溶液处理后 用清水处理后
液泡大小和颜色变 化 原生质层与细胞壁的关 系 紫色的中央大液 泡,
中央液泡变小,颜 色加深
中央液泡逐渐胀 大,
原生质层紧贴着细胞 壁。
原生质层脱离细胞壁
原生质层又逐渐贴向 细
颜色变淡 胞壁
4、用紫鸭跖草检测0.1g/mL 0.3g /mL 0.6g / mL的蔗糖溶液。 五、注意事项:
1、 要节约实验材料,可以将洋葱鳞片叶切成小块分给学生。 2、 在撕取洋葱鳞片表皮时,要注意不要让表皮细胞中的液泡破损,否则影响实 验结果,
判断液泡是否破损的依据是:完整的、液泡未破的洋葱鳞片叶表皮 是紫红色的,而破损的则是无色半透明的。 3、 用显微镜观察时,不能直接用高倍镜,应先在低倍镜下观察,再用高倍镜观 察,若低
倍镜下看得很清楚,就不必用高倍镜观察了。
4、不能直接在载物台上滴加蔗糖溶液和清水,必须在实验桌上进行,并且必须 重复几
次。 5、 使用的外界溶液浓度要适当,浓度过大,质壁分离速度快,但会影响细胞的 &注意在洋葱未经过处理时一定要取外表皮
7、整个过程中,观察细胞一定要保持活性。 板书部分: 四、实验步骤: (一) 制作临时装片并观察
1、 制片
擦滴取浸展盖 ― 2、 观察洋葱细胞 (二) 观察质壁分离及复原
1、观察质壁分离现象 滴蔗糖吸引观察一
2、 观察细胞质壁分离的复原现象 滴清水吸引观察f
3、 画出所观察到的图形并用表格记录现象
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