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DNA的结构、复制及功能
一、DNA的结构
1、一级结构
注意结合下图掌握好一些基础知识:脱氧核苷酸的结构、种类、核苷酸的种类、碱基的种类、核酸的种类、单链的形成、双链的形成、破坏氢键的方法(加热、酶处理)等
2、空间结构
(1)稳定性:在双螺旋结构的外侧是由磷酸与脱氧核糖交替连接构成的骨架,内部是氢键连接形成的碱基对,从而保证了DNA分子的稳定性。
(2)多样性:构成DNA分子的脱氧核苷酸数目成千上万,碱基对的排列顺序千变万化,从而决定了DNA分子的多样性。DNA分子的多样性又决定了蛋白质分子的多样性,从而构成生物体的性状的多样性。
二、DNA的复制
1、DNA复制的过程
(1)注意理解DNA复制的场所、所需要的条件、复制的特点。
命题方向:①细胞内DNA的复制②体外试管中的人工模拟DNA的复制过程。
2、与DNA复制相关的考点(重点)
①、用同位素示踪法来研究DNA复制的特点
例题1:用一个32P标记的噬菌体侵染细菌。若该细菌解体后释放出32个大小、形状一样的噬菌体,则其中含有32P的噬菌体有( )
A、0个 B、2个 C、30个 D、32个
例题2:DNA复制方式,可以通过设想来进行预测,可能的情况是:全保留复制、半保留复制 (1)根据图中的示例对两种复制作出可能的假设:
①如果是全保留复制,则一个DNA分子形成两个DNA 分子,其中一个是亲代的,而另一个是新形成的;②如果 是半保留复制,则新形成的两个DNA分子,各有一条链来 自亲代DNA,另一条链是新形成的。 (2)请设计实验来证明DNA的复制方式。
①在氮源为14N的培养基中生长的大肠杆菌,其DNA分子均为14N—DNA(对照)。 ②在氮源为15N的培养基中生长的大肠杆菌,其DNA分子均为15N—DNA(亲代)。
③将亲代15N大肠杆菌转移到含14N的培养基中,再连续繁殖两代(Ⅰ和Ⅱ),用密度递度离心方法分离。 实验预测:
①如果与对照(14N/14N)相比,子代Ⅰ能分辨出两条DNA带,分别是一条轻密度带和一条重密度带,则可以排除半保留复制,同时肯定是全保留复制。 ②如果子代Ⅰ只有一条中密度带,则可以排除全保留复制。
③如果子代Ⅰ只有一条中密度带,再继续做子代ⅡDNA密度鉴定,子代Ⅱ可以分出1/2中密度带和1/2轻密度带,则肯定是半保留复制;用图例表示出最可能的实验结果。
(3)有人提出:第一代(Ⅰ)的DNA用解旋酶处理后再离心,就能直接判断DNA的复制方式,如果轻带和重带各占1/2,则一定为半保留复制。你认为该同学的说法是否正确?不正确,原因是;因为不论是全保留复制,还是半保复制,其第一代用解旋酶处理后都有一半的单链含15N,一半的单链含14N,离心后都有一半在重带上,一半在轻带上。
②、通过分子杂交技术对碱基互补配对原理的考察(如基因探针)
例3、已知鸡的成熟红细胞合成β—珠蛋白,胰岛细胞合成胰岛素。用编码上述两种蛋白质的基因作探针,分别对两种细胞中提取的总DNA片段进行杂交,结果显示为实验一;分别对两种细胞中提取的总RNA片段进行杂交,结果显示为实验二。
实验一:细胞总DNA 实验二:细胞总RNA 成熟红细胞 胰岛细胞
成熟红细胞
胰岛细胞 β—珠蛋白基因 + + + —
胰岛素基因
+
+
—
+
注:+为阳性结果;—为阴性结果
(1)实验一结果表明:两种细胞均存在β—珠蛋白基因和胰岛基因;
实验二结果表明:成熟红细胞中有β—珠蛋白基因的表达的mRNA,而没表达胰岛素基因的mRNA;胰岛细胞则反之。 (2)试分析:成熟红细胞合成β—珠蛋白而不合成胰岛素的原因是:基因选择性表达 (3)在实验二的DNA分子探针杂交实验中碱基配对的原则是:A—U、G—C、C—G、T—A (4)试判断:合成蛋白质的遗传密码是否在探针上,并说明理由:不在,因为探针是用DNA片段做的,而遗传密码存在于mRNA上
归纳:基因探针可用于基因的检测、基因表达的检测、基因诊断、环境检测等。
③、在细胞分裂中对DNA复制的考察。
A、与染色单体的关系的理解:复制完成后每条染色单体中含一条亲代DNA单链。 B、用放射性元素标记T,分析放射性量在G1、S、G2三个时期的变化
C、在植物个体发育中用放射性元素标记脱氧核苷酸供给受精卵,通过检测球状胚体和胚柄的放
射性量的大小来判断顶细胞与基细胞分裂的速度大小。
D、在动物个体发育中从卵细胞到囊胚的变化中DNA的数量变化曲线。
④、DNA中碱基序列的测定
若在第1张图中碱基序列为:GCAGTCA, 则第2张图中碱基序列为: CGAGACT
⑤、PCR技术(《世纪金榜》第252面第11题)
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