北大医学部实验动物学考试内容

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近交系：在一个动物群体中，任何个体基因组中99%以上的等位位点为纯合时定义为近交系。经至少连续20代的全同胞兄妹交配或亲子交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到第20代或以后代数的一对共同祖先。

封闭群：以非近亲交配方式进行繁殖生产的实验动物种群,在不从外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上的群体。 SPF级动物：除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物。

自发性动物模型 ：指实验动物未经任何人工处置，在自然条件下动物自然发生、或由于基因突变的异常表现通过遗传育种保留下来的动物模型。包括裸鼠、SCID小鼠、白内障小鼠、癫痫大鼠、肥胖症小鼠、无毛小鼠、自发性高血压大鼠、青光眼兔等。

诱发性动物模型：以物理的、化学的或生物的致病因素作用于动物，造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病时功能、代谢或形态结构方面的改变，以供研究用。 基因改变疾病模型：是指利用分子生物学技术手段，如转基因、基因打靶、基因敲除、基因置换、基因捕获等技术，将已知的一个或多个基因导入动物胚胎细胞或从动物胚胎细胞中剔除，培育成携带或缺失某种或几种基因的动物。 转基因动物：是指用实验的方法将外源基因导入早期胚胎细胞，使之整合于细胞基因组中而建立的动物品系。整合的外源基因称为转基因。

屏障环境(barrier condition)：符合实验动物居住的要求，严格控制人员、物品和环境空气的进出。适用于饲育清洁实验动物及无特定病原体实验动物（SPF ）

隔离环境(Isolation condition)：采用无菌隔离装置以保存无菌或无外来污染物。隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持内环境一致。该环境设施适用于饲育无特定病原体（SPF）、悉生（Gnotobiotic animal）及无菌实验动物(germ free animal) 。1、实验动物：是指经人工培育的、遗传背景清楚、对其携带微生物和寄生虫实行控制、用于科学实验、教学、检定及药品、生物制品生产的动物。

2、实验用动物包括：实验动物(Laboratory animals)家畜 (domestic animals)野生动物 (Wild animals)

3、实验动物学：是以生物学、动物科学、 动物医学、医学、药理学、毒理学等学科为基础，综合发展而形成的一门覆盖面极广的边缘学科。

4、实验动物伦理：是人与实验动物关系的伦理信念、道德态度和行为规范。主要体现在尊重实验动物的价值和权利。 5、实验动物五项基本福利：

一，提供适当的清洁饮水和食物，使动物不受饥渴之苦

二，提供适当的栖息场所，能舒适地休息和睡眠，使动物不受困顿不适之苦 三，预防疾病和给患病动物及时诊治，使动物不受疼痛、伤病之苦 四，保证拥有良好的条件和处置（包括安乐死），使动物不受恐惧和精神上的痛苦

五，提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起，使动物能够自由表达正常的习性

转基因小鼠技术发展到目前已经历了四个阶段：

1. 实现外源基因的导入。2. 实现外源基因的定点整合-基因打靶。3. 实现外源基因的组织特异性表达。4. 实现外源基因的时间可控性表达。

基因打靶(gene targeting)：基因打靶技术的应用，一方面可以使导入的外源基因定点整合于人们希望整合的部位，从而避免了外源基因随机整合对内源基因的影响。 基因敲除(gene knockout)：另一方面，人们还可以利用基因打靶技术定点灭活一个内源基因，


转基因动物的应用

1. 基因功能的研究2. 建立疾病动物模型3. 建立转基因动物生物反应器4. 异种器官移植 转基因小鼠的制备方法？

1.选择小鼠品系：可以用远交系也 可以用近交系。一般采用两种近交系的杂交一代。 2. 收获受精卵-超排卵：显微注射需要的受精卵可以通过小鼠自然交配得到，但数量常不能得到保证。因而需对雌鼠施以激素以获得足够数量的受精卵——即诱导超排卵。 3.导入外源基因：常用：（1）. 显微注射法（2.） 逆转录病毒载体法（3）. 电脉冲法。 4. 代养母鼠的制备：不育雄鼠和假孕母鼠。

5.受精卵植入：将导入外源基因的受精卵植入假孕母鼠的输卵管或子宫内发育 6. 首建转基因鼠 (founder)中转基因的检测。 7. 通过繁育建立转基因小鼠品系。

（1）.互交得到转基因纯合子小鼠 2）.回交至少10代建立纯系转基因小鼠 动物实验替代方法（3R）

●减少（Reduction）科学研究活动中的动物使用量

●探索和建立能够达到相同目的或获得相同结果的动物实验替代（Replacement）方法

●采用一切可行的技术和手段，使动物免受试验所造成的痛苦、不安和疼痛或/和改善生活环境，从而提高动物生存质量的优化（Refinement）方法

仁慈终点是动物遭受疼痛、痛苦或是动物濒临死亡前的最早指征，它是人为确定的、具有典型的临床表现、并在达到试验目的前提下可以终止试验的某一阶段（点）。 选择仁慈终点的目的是能够在对大程度上减轻动物所承受痛苦。

仁慈终点作为一种可减轻动物疼痛和痛苦的动物试验优化方法应得到推广应用。

DBA/1fC57BL/6J ：DBA: 小鼠品系名1 ：亚系名f：表示代乳 C57BL: 代乳母鼠品系名称6：亚系名J：亚系名

近交系动物的特点和应用： 1、 基因位点的纯合性

采用近交系动物进行实验时，不会因为隐性基因的暴露而影响实验结果。 2、遗传组成的同源性

在同一品系内的动物个体间进行皮肤或其他组织移植，植入物不会被当作异已而排斥。是组织细胞和肿瘤移植试验中最为理想的材料。 3、表型的一致性

近交系表型上的一致性使得使用较少量的动物即可达到统计学的精确程度 4、长期遗传的稳定性

个体遗传变异仅发生在少量残留杂合基因作用、基因突变和遗传污染三种情况下 5、对外界因素的敏感性

优点：更容易成为模型动物。缺点：对实验处理反应不同。 6、遗传特征的可分辨性 7、遗传组成的独特性

8、分布的广泛性 保证实验的重复性

9、背景资料的完整性 这些基本数据为设计新的实验和解释实验结果提供了便利条件。 10、生活力： 由于近交衰退，生育力和生活力较低。不能接受剧烈的实验处理；生产和试验的成本较高。

 近交系小鼠：BALB/c、C57BL/6、DBA/2

 近交系大鼠：ACI 、LEW、SHR、WKY、F344 封闭群动物的特点及应用

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