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成骨细胞矿化结节染色液(茜素红S法)
简介:
成骨细胞分化是其主导骨形成的前提与基础。在成骨分化过程中,其最基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟,而矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志,同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学表现,观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用手段之一。
成骨细胞矿化结节染色常用方法有四环素法和茜素红S法,应用茜素红溶液对成骨细胞染色,茜素红可与钙离子螯合,产生深红色或紫红色的复合物,可用于鉴定干细胞是否已成功向成骨细胞分化。
组成:
编号 名称
DS0101 2×50ml 50ml 50ml
Storage
试剂(A): Ob固定液 试剂(B): 茜素红S染色液 使用说明书
RT RT避光 1份
自备材料:
1、 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) 2、蒸馏水 3、显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、 成骨细胞经培养,胰酶消化,接种培养于6孔板中,每孔有1×105个细胞。 2、 细胞连续观察、换液,培养14天。
3、 小心吸除培养液,加入足量Ob固定液固定。 4、 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS)洗涤各孔3次,每次。
5、 加入茜素红S染色液染色30min,可根据染色情况酌情增加或减少染色时间。 6、 蒸馏水洗去染色液。肉眼可见细胞呈明显的紫红色。 7、 光镜下观察拍照。
染色结果:
钙结节
紫红色-深红色
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注意事项:
1、 茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定。一般30min即可。 2、 Ob固定液宜挥发,开启后应密封保存;如使用量大可用95%乙醇替代。 3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相:
编号
CA0075 DC0032 DF0111 DS0003 PE0080 PT0013 TO1013
名称
青霉素-链霉素混合溶液(100×双抗) Masson三色染色液 中性福尔马林固定液(10%) 钙盐染色液(Von Kossa硝酸银法) Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH6.8) 考马斯亮蓝快速染色液
丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)
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