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细胞房工作守则及注意事项
细胞房工作守则及注意事项 一、?常规操作
??1.?穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套,可脱在门外的衣帽架上。 2.?穿着专用拖鞋。在缓冲间换下自己的鞋子,尽量避免在缓冲间走动、停留。
3.?细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。
二、?培养箱使用规则
??1.?从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。
注:?培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。
2.?培养瓶皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
3.?2-3人共用一层培养箱,按预定位置摆放培养器皿,方便查找,以免长时间敞开培养箱。
4.?普通培养中的细胞,若非实验需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。
注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。
三、?显微镜使用规则
??1.?显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
2.?离开细胞房时或较长时间不需使用时,及时关上电源,延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。
四、?超净台相关操作规则
??1.?超净台使用遵循预约原则。无预约者若有必要在他人预约时段内使用,需先征得预约者的同意,否则应无条件让出工作台,以免耽误他人实验。 ??2.?超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌,使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台内使用前均应消毒。
??3.?点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3。
注:?消毒用75%的酒精,酒精灯用95%的酒精,向喷壶或灯内添加酒精时请
留意。
注:?酒精和酒精棉球由值日生负责补给,发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。
??4.?超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只,用于暂时存放废弃物,实验结束后将杯内垃圾倒入水池或垃圾桶中,并冲洗晾干备用。
注:?将废弃的枪头、管子内的残留液体打(倒)入废液杯后再弃入废品杯中,以免垃圾桶内留有大量培养液滋生细菌。
??5.?可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等,放入装有清水的塑料桶中浸泡,桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。
注:?可回收器皿必要时先初步涮洗后再放入桶内,尤其是培养瓶或血清管中有大量高营养的液体残留时,容易使桶内的清水长菌。 保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满,而不是在装有大量空气的情况下被压倒桶底。
塑料桶内物品由值日生每天负责送去清洗,使用者实验结束后若发现桶已装满,请通知值日生或顺手将塑料桶带出细胞房。
??6.?装培养液的瓶子、配培养液的器皿勿放入塑料桶内浸泡!应由使用者本人及时清洗晾干备用。
注:?因桶内物品通常要浸泡几小时以上才送去清洗,此时细菌可能已在桶中生长并释放内毒素。细菌内毒素很难通过常规湿热灭菌步骤去除干净,即使干烤也不能保证其完全失活。内毒素对细胞生长及多种实验均有较大影响。 ?洗涤程序:洗洁精洗净,清水冲十次以上去除洗涤剂残留,然后冲去离子水3次,再用双蒸水1次,倒置于器皿柜中晾干。关上器皿柜的门防尘。
五、?培养液、试剂等相关操作规则
??1.?从冰箱取放物品动作要迅速,关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。 ??2.?培养液母液是公用,由值日生负责配制,长期存放于-20℃。使用时按比例加入血清配成培养液工作液,打开使用后的母液存放于4℃,要注意避免污染。发现4℃存放的培养液量不足时及时从-20℃中预解冻,若-20℃中已没有储备,请及时通知值日生。
3.?分装好的血清长时间保存于-20℃,使用前放于4℃预解冻。从-20℃取用血清者需登记,并在血清管上签上使用者名字,若使用别人解冻的血清需征得同意以免耽误他人实验。按需解冻,避免反复冻融。
4.?原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用,若有剩余,则暂存于4℃并尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清,以免交叉污染。
六、?值日生工作职责
??1.?每周值日生时间从周六开始,至下周五结束。
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