凝集反应(ABO血型的鉴定)

2022-04-04 23:10:15   文档大全网     [ 字体: ] [ 阅读: ]

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实验一 凝集反应(ABO血型的鉴定)

[实验目的]

1.掌握凝集反应的原理,玻片法和试管法凝集实验的实验方法和结果分析。

2.了解凝集反应基本类型及血型鉴定的各种方法包括正、反定型,血型板鉴定法和血型卡鉴定法。 [实验原理]

在一定浓度的电解质溶液中,颗粒性抗原与相应抗体结合后,出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应。人类ABO血型抗原主要有AB两种,根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种。据此,将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合,抗A或(和)抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,据其凝集情况便可判定出受试者的血型。 [实验器材]

1 器材:光学学显微镜,消毒缸

2 材料:消毒干棉球,一次性采血针,载玻片,玻璃试管,一次性带刻度朔料吸管,医用

黄色垃圾袋

3 试剂:75%医用酒精,0.9%NaCl注射液,抗血清试剂抗A、抗B [内容与方法] ()玻片法凝集实验

1.用酒精棉签消毒被检者手指尖端,以采血针刺破皮肤,稍加挤压,使血液流出。滴12滴血液于含有1ml生理盐水的试管内,摇匀,制成约0.5%血球悬液。用干棉球止血。 2.取洁净载玻片1块,在中间用蜡笔画一条竖线,将抗AB分型试剂分别加1滴于载玻片两端。

3. 用毛细吸管吸取血球悬液,在白瓷板的两个圆孔内各加一滴,并充分混匀,放置510钟。

4.肉眼观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分散。若肉眼观察不明显,可在显微镜下观察是否存在微小凝集 5.记录凝集情况,判定受检者的血型。 (二)试管法凝集实验

1.用酒精棉签消毒被检者手指尖端,以采血针刺破皮肤,稍加挤压,使血液流出。滴12滴血液于含有生理盐水的试管内,摇匀,制成约0.5%血球悬液。用干棉球止血。 2.取洁净试管2支,分别标记上AB字样,将抗AB分型试剂分别加1滴于相应标记的试管中

3用一次性吸管吸取血球悬液,2支标记试管中各加一滴,并充分混匀,放置510分钟。 4.观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分散。若肉眼观察不明显,可在显微镜下观察是否存在微小凝集 5.记录凝集情况,判定受检者的血型。

(三)演示实验(包括反定型鉴定法、板式和卡式法的结果判读)

1.实验老师准备0.5%标准红细胞:A型、B型、O型,已分离血浆的抗凝血

2.取洁净试管3支,分别标记上ABO字样,将受检者血浆加入已标注ABO字样的试管中各1滴。

3用一次性吸管吸取0.5%标准红细胞血球悬液ABO 型,分别加于相应标记的试管内,并充分混匀,放置510分钟,(离心后观察结果)

4 观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分

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散。若肉眼观察不明显,可在显微镜下观察是否存在微小凝集 5.记录凝集情况,判定受检者的血型。

6.实验老师准备已使用的血型板和血型卡各20份,分发给学生,让学生判读正确的血型, [作业与思考]

1 简述直接法鉴定血型的原理。

2 表格的方式绘制出正反定型血型结果判读的标准? 3 思考:反定型血型鉴定实验的原理

4 思考:在各凝集试验中都设有相应对照,有何意义?若对照出现异常如何分析及解决? 5 思考:直接凝集试验与间接凝集试验有何不同?

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