高效液相色谱测定萘的含量

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高效液相色谱测定萘的含量

一 实验目的

1 熟悉HPLC的结构和操作 2 了解反相高效液相色谱法

3 掌握峰面积归一化法定量方法 二 实验原理 1 仪器结构

储液器→高压泵→进样器→色谱柱→检测器→记录仪 ↓

等度洗脱

2 分离原理

在反相高效液相色谱中其分离原理取决于组分与固定相间作用力的大小差异，组分的非极性相对最强，与固定相作用最强，故保留时间最长，最后被洗脱。

3 面积归一化法

Xi%＝［Ai／（A1＋A2＋…＋An）］·100%

三 仪器与试剂

1 LC200高效液相色谱仪，手动进样阀，微量注射器（25μL）,C18柱,超声波脱气机，抽滤器。 2 试剂：甲醇、萘。 四 实验步骤

1 将实验用流动相进行过滤和脱气处理

2 开机，依次打开泵、检测器、工作站。调整色谱条件（检测波长：254mn v=1.0mL/min,流动相，甲醇，柱温：室温），平衡色谱系统。 3 基线平稳后，取含萘试样5μL进样，记录各峰tR和A。 4 清洗色谱柱，关机。 五 结果处理

1 确定萘的出峰时间。

2 计算样品中萘的百分含量。

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