竹叶总黄酮的提取和测定

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竹叶总黄酮的提取和测定

实验目的：

1. 了解总黄酮类化合物的一般制备实验原理及方法 2. 掌握总黄酮类化合物的制备方法和测定方法 3. 培养验证和解决某一实际问题的能力和创新意识 实验原理：

1． 竹叶中含有大量总黄酮化合物，竹叶中黄酮类物质的相对极性

决定了竹叶中含有的大量黄酮类物质可用较大极性的溶剂（乙醇）提取。 材料和用品： 1. 药品

竹叶、芦丁标准品、75%乙醇﹑70%乙醇、60%乙醇、5%亚硝酸钠、10%的硝酸铝溶液、l mol/ L 氢氧化钠溶液 2 仪器

粉碎机、60目筛、恒温水浴锅、真空干燥箱、紫外—分光光度计、50ml容量瓶、10ml容量瓶、电子天平、滤纸、漏斗、烧杯、量筒、玻璃棒 方法与步骤： 1 总黄酮提取

⑴ 将竹叶干燥粉碎过60目筛。

⑵ 称取50g竹叶粉三份，分别加入体积分数75%的乙醇500ml、1000ml、1500ml.

⑶ 70℃水浴提取1.5h后过滤取滤液。

⑷ 将三份滤液混合后水浴蒸发浓缩（温度不宜过高）待乙醇蒸发完


后，将浓缩液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体，粉碎得终产物。 ⑸称量计算产率。 2 总黄酮的测定 ⑴ 标准液的配制

精确称取芦丁标准品10mg,置于50ml容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴微热使溶，放冷，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀即得0.2g/L的标准溶液。 ⑵ 标准曲线制作

精密吸取标准液0.0﹑1.0﹑2.0﹑3.0﹑4.0﹑5.0ml,分别置于10ml容量瓶中，各加60%乙醇溶液使成7ml，精密加入5%亚硝酸钠0.3ml，摇匀，放置6min,精密加入10%的硝酸铝溶液0.3ml，摇匀, 放置10 min, 加入l mol/ L 氢氧化钠溶液2 mL. 分别用60%乙醇稀释至刻度, 摇匀,放置10 min ， 在510 nm 处测吸光度,

管号

0.2mg/ml芦丁标准液(ml) 5%亚硝酸钠(ml) 10%硝酸铝(ml)

1mol/l氢氧化钠(ml) 芦丁含量（mg）

1 0.0 0.3 0.3 2 0.0

2 1.0 0.3 0.3 2 0.2

3 2.0 0.3 0.3 2 0.4

4 3.0 0.3 0.3 2 0.6

5 4.0 0.3 0.3 2 0.8

6 5.0 0.3 0.3 2 1.0

OD510nm

⑶ 样品溶液配制

称取1.5g样品，置于50ml容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴微热使溶，放冷，用60%乙醇稀释至刻度。 ⑷ 样品溶液测定

精密吸取1.0ml样品液，置于10ml容量瓶中，各加60%乙醇溶液使成7ml，精密加入5%亚硝酸钠0.3ml，摇匀，放置6min,精密加入10%的硝酸铝溶液0.3ml，摇匀, 放置10 min, 加入l mol/ L 氢氧化钠溶

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