花粉萌发试验方法

2024-01-13 01:20:23 文档大全网 [ 字体：小中大 ] [ 阅读： ]

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花粉萌发试验方法

1.花粉萌发率和花粉管长度的测定：花粉培养采用固体培养基。培养基组分为：1%琼脂、10%蔗糖、0.01%硼酸、0.03%硝酸钙，pH为6．5。将花粉播种到培养基上后，在25℃、100％空气湿度、避光条件下培养6 h后，在显微镜下观察花粉的萌发和生长情况。100ml：1 g琼脂，10 g蔗糖，0.01g硼酸，0.03g硝酸钙。

2.培养基的制备：在烧杯中加入100 mL蒸馏水，再加入1％琼脂，在酒精灯上加热，使之完全熔解，然后加入15％蔗糖，制成15％的糖液。本实验加入了100 mg／L硼酸，以促进花粉的萌发。

2.测定花粉萌发率的培养基按蔗糖15％、硼酸15mg/L、琼脂0.5％制备，经高压灭菌后置冰箱内保存，使用时加热熔化为液体培养基待用。花粉培养与萌发率测定时，用无菌滴管吸两滴液体培养基于载玻片的两处，用毛笔蘸花粉撒播于培养基上，将载玻片放人垫有湿滤纸的培养皿中，于室温下培养和镜检。花粉播种后4小时镜检萌发情况，在10×10倍视野下计取3—5个视野的花粉萌发数和花粉总数，计算花粉萌发百分率[3‘5】。以花粉管长度大于花粉粒直径的

1／2为花粉萌发的标准，花粉数以3—5个视野的花粉粒总数超过100个为宜[3。7】。

3.参照程中平等的方法，采用含10％蔗糖和0．8％琼脂的培养基。

注意：在熬制时要用玻璃棒不断搅拌，使其融化均匀，还可加入微量柱头渗出液、维生素等以形成花粉粒发芽的最适环境条件。。然后集中放在一个大的瓷盘中，用纱布覆盖后加盖，放于25℃的温箱

内培养。实验表明：花粉在播8 h后，发芽数不再有明硅增加。在播后12 h在低倍显微镜下检查发芽情况，直至花粉粒发芽数不再增加为止，记载花粉发芽数，以明确不同仡粉的发芽速度和发芽进程。