枸橼酸钠替代EDT

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枸橼酸钠替代EDT

【摘 要】目的：分析同时对抗凝剂 EDT A及枸橼酸钠所致的血小板聚集现象，观察仪器法和手工计数法对血小板聚集标本的不同检测结果，提高认识，防止因病例罕见而出现错报检验结果，造成误诊误治。方法：用 Sysmex - XN3000血液分析仪检测两组 EDT A抗凝血和枸橼酸钠抗凝血 ,同时采指血手工计数血小板和抗凝血涂片显微镜镜检。结果：EDT A抗凝血血小板数值与枸橼酸钠抗凝血结果相近 ,均明显低于血小板手工法结果，聚集程度随时间的延长而增加。结论：对于首次检测血小板数值减低的标本均应手工计数血小板或涂片镜检 ,以确认是否存在抗凝剂所致血小板聚集现象。对于多种抗凝剂均聚集的标本应采取立即检测及手工计数相结合的方法。

【关键词】EDT A；枸橼酸钠；血小板聚集；血小板计数

【中图分类号】R 285 5 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）5-0049-01 1 资料和方法 1.1 血液标本

标本来源于对两种抗凝剂均聚集的患者,每次病人抽两管血 , EDT A – k2抗凝静脉血与枸橼酸钠抗凝静脉血 ,同时采指血做血小板手工镜检。 1.2 仪器与试剂

1.2.1 Sysmex - xn3000血液分析仪 (希森美康公司 )与配套试剂。 1.2.2 OLmpus显微镜。

1.2.3 按照操作规程配制的草酸铵血小板稀释液。

1.2.4 EDT A – k2真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管 (作凝血检查抗凝管)。 1.2.5 瑞 -吉氏染液。 1.3 方法

1.3.1 仪器分析: Sys mex - xn3000血液分析仪用 e - check质控品监控稳性 ,按操作规程操作。首先用常规方法检测 EDT A – k2抗凝静脉血 ,然后以同样方式检测枸橼酸钠抗凝静脉血。因两者为液体抗凝剂 ,其抗凝剂与血液之比为1: 9,故细胞计数结果应再乘 1.1方为准确的结果 ,本文中所有抗凝管结果均为校正后的数值。

1.3.2 每例病人均采指血手工计数血小板 -按文献[1]方法操作。

1.3.3 每例病人的 EDT A抗凝血与枸橼酸钠抗凝血均涂片经瑞氏染色后显微镜镜检。 2 结果

EDTA抗凝血血小板数值与枸橼酸钠抗凝血结果相近 ,均明显低于血小板手工法计数结果。。血小板数值详见表 1此结果测定时间为标本采集后30-40分钟测定结束。 表 1 3种方法检测血小板结果比较( 109/L) NEDTA抗凝血枸橼酸钠抗凝血手工计数法 530 ± 1031± 13173 ± 35


两种抗凝剂所抗凝标本均随时间延长发生聚集程度加剧的现象。标本离体20分钟后聚集变化趋于稳定。血小板数值详见表2

表2 两种抗凝剂所抗凝标本血小板数值随时间变化表 抗凝剂/ 时间（分钟）5101520

EDTA抗凝血180 ± 31110 ± 2861 ± 2320± 15 枸橼酸钠抗凝血182± 30105± 3059 ± 2019 ±13 3 讨论

同时对抗凝剂 EDT A及枸橼酸钠所致血小板聚集的病例非常少见。EDT A – k2的抗凝原理是与血液中钙离子结合成螯合物 ,而使钙离子失去凝血作用 ,从而阻止血液凝固。因其对血细胞形态影响很小 ,特别适用于全血细胞分析 ,已被 I CSH认定

并在临床广泛使用。但它偶尔可导致血小板聚集 ,发生血小板假性减少 ,EDT A导致血小板聚集的原因与血小板表面存在某种隐性抗原有关。EDT A可导致血由于在 EDT A - K2作为抗凝剂的前提下出现的免疫介导,使血小板互相发生凝集现象[2]。Bragnani等认为 , EDT A可导致血小板活化 ,因而改变血小板表面某种隐匿性抗原构象 ,与存在于血浆中的自身抗体结合 ,激活 PLA、 PLC、 AA、 ADP、 5 - HT等活性物质[3]。这些活性物质又能活化血小板纤维蛋白原受体 ,促使血小板与纤维蛋白原聚集成团 ,出现使血小板互相凝集现象。这种 EDT A依赖的冷抗血小板自身抗体直接作用于血小板膜糖蛋白 Ⅱb /Ⅲa上 ,同时这种与血小板结合的自身抗体 Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上 Fc受体结合 ,出现卫星现象。

出现EDT A聚集一般采用枸橼酸钠[4]做为抗凝剂替代。枸橼酸钠所致血小板假性减少的机理有待进一步研究。由于此现象极少见 ,且枸橼酸钠抗凝血是解决 EDT A依赖性血小板聚集的主要方法之一 ,故血小板对枸橼酸钠产生聚集的现象非常容易被忽略而导致假性血小板减少 ,因此对此类标本应引起足够的重视。对于血小板聚集标本的测定应遵循的原则：所有标本均应推片镜检，手工计数进行对照，标本采集后立即测定。 参考文献：

[1]叶应妩,王敏三 1全国临床检验操作规程 [M ]1第 3版 1南京:东南大学出版社, 2006: 136 – 1371

[2]于波海,范艳玲,沈伟霞,等. 乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少症病例分析 [ J ]. 中国自然医学杂志, 2007, 9 (1) : 68 - 69

[3]郭旭霞,王立兵,闫慧. EDTA - K2致假性血小板减少分析 [ J ].长治医学院学报, 2007, 21 (1) : 55 – 57

[4]LambartsAJ, Zijlstra JJ, Peters RH, et al1Accurate p latelet counting inan insidious case 0f p seudothrmobocytopenia [ J ] 1Clin - chem LabMed, 1999, 37 (6) : 1063 – 106

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